快速检验血液中的新型毒品
来源: 毒品测试网   发布时间: 2019-07-13 23:11   123 次浏览   大小:  16px  14px  12px
使用了超高效液相色谱串联质谱法来检测血液中的毒品,同样也可用在检测头发上。
血液检测毒品
新精神活性物质(NPS)是通过对现有毒品分子结构进行微小修饰或改变的化合物,其毒性和危害性不亚于传统毒品。新精神活性物质主要分为7大类,哌嗪类是其中较重要的一类。1996年美国首次报道哌嗪类化合物的滥用,随后各国滥用的报道逐年增多,20世纪初该类药物在世界范围内最为流传。当前,使用最为广泛的哌嗪类新精神活性物质为苄基哌嗪(BZP)、1-(3-三氟甲基苯基)哌嗪(TFMPP)和1-(3-氯苯基)哌嗪(mCPP),这三种哌嗪类物质具有与摇头丸(MDMA)相似的兴奋作用和致幻作用,成了迷幻药的替代品。

分别准确称取10.0mg(精确到0.01mg)的苄基哌嗪;1-(3-三氟甲基苯基)哌嗪;1-(3-氯苯基)哌嗪标准品,用乙腈定容到10.0mL,配制成1.0mg/mL的标准单标储备液。使用前,用10%乙腈水稀释至所需要的混合标准工作液。

准确移取血液0.5mL,加入pH=9的缓冲溶液0.3mL。震荡1分钟后将样品加入固相支撑液液萃取柱中,自然下沉,待样品全部均匀分散在填料上后,静置5.0分钟。用5.0mL氨化乙酸乙酯洗脱,控制其流速在1.0mL/分钟左右。洗脱液在40摄氏度下用氮气吹干,用10%乙腈水定容至1.0mL,经0.22um有机膜过滤,滤液供UPLC-MS/MS分析。

采用电喷雾离子源正离子扫描模式(ESI+),多反应监测扫描模式(MRM);离子源电压(IS):5500V;源温度(TEM):500摄氏度;气帘气(CUR):0.25MPa;喷雾气(GSI):0.50MPa;辅助气(GS2):0.50MPa;碰撞气(CAD):0.03MPa。

选择ESI(+)电离模式,使用注射针泵分别注入3种哌嗪类药物标准品。在m/z150-250的扫描范围内进行母离子扫描,在一级全扫描质谱中得到母离子质量数[M+H]+。调节仪器参数,选择[M+H]+作为母离子进行二级质谱裂解分析,不断增加碰撞能,子离子碎片逐渐增多。最终选定强度最高的2对子离子与母离子组成2对离子对,作为定性分析的指标,并以最强的离子对作为定量分析的指标。同时,对去簇电压、碰撞能量等参数进行优化。在选定的条件下检测目标物。结果显示,3种哌嗪类药物均分离良好。

样品净化的目标是要尽可能除去生物样品中的杂质,同时最大限度保留目标物,降低基质效应的同时,保证较高回收率。

实验考察了3种前处理方法。(1)乙腈沉淀蛋白法:采用80%乙腈沉淀蛋白,经10.0分钟离心取上清液,过0.22um滤膜后直接进行仪器检测。(2)HLB固相萃取法:准确移取血液0.5mL,加入pH=9的缓冲溶液0.3mL。震荡1.0分钟后将混合液离心取上清,上柱淋洗后用甲醇洗脱,氮吹浓缩用初始流动相定容,过0.22um滤膜后直接上样。(3)固相支撑液液萃取发:准确移取血液0.5mL,加入pH=9的缓冲溶液0.3mL。震荡1分钟后将样品加入固相支撑液液萃取柱中,自然下沉,待样品全部均匀分散在填料上后,静置5.0分钟。用5.0mL氨化乙酸乙酯洗脱,控制其流速在1.0mL/分钟左右。洗脱液在40摄氏度下用氮气吹干,用10%乙腈水定容至1.0mL,经0.22um有机膜过滤,滤液供UPLC-MS/MS分析。

对三种样品处理方法进行对比,其中乙腈沉淀蛋白法,操作简单,但存在一定基质效应,回收率约为60%。固相萃取法,相对操作繁琐,耗时长,容易造成小柱堵塞。3种药物回收率小于40%。固相支撑液液萃取法效果较好,操作简便,回收率达到90%以上,满足实际要求。

在优化的实验条件下进行方法学的考察。取空白全血5份各0.5mL。分别配制成0.8、4、20、100、500、1000ng/mL标准品。进行前处理后,进行仪器分析。以不同浓度目标物的峰面积进行线性回归,结果表明3种哌嗪类药物在1-500ng/mL范围内有良好线性关系,相关系数为0.9995-0.9997,以3倍信噪比(S/N)对应的添加水平作为检出限(LOD),10倍信噪比(S/N)对应的添加作为定量限(LOQ)。

方法采用空白血样添加标准混合目标物方式,在空白血样中分别添加4.0、40.0、400.0 ng/mL标准品,每个浓度血样平行配制3份样品。

采用固相支撑液液萃取方法处理样品,以超高效液相色谱-质谱法对血液中的苄基哌嗪(BZP)、1-(3-三氟甲基苯基)哌嗪(TFMPP)和1-(3-氯苯基)哌嗪(mCPP)同时进行分析。通过对色谱、质谱条件和前处理方法的优化,建立了同时检测全血中苄基哌嗪(BZP)、1-(3-三氟甲基苯基)哌嗪(TFMPP)和 1-(3-氯苯基)哌嗪(mCPP),LLE-UPLC-TQ/MS分析方法。本方法快速灵敏、回收率高,能够满足实际办案的需求。

中国法医学杂志20193403

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